T淋巴細(xì)胞分化抗原檢測的操作方法及臨床意義
操作方法
1.免疫組織化學(xué)染色法
?。?）免疫熒光顯微技術(shù)：使熒光抗體與細(xì)胞表面的T淋巴細(xì)胞分化抗原進(jìn)行反應(yīng)，洗滌除去游離的熒光抗體后，在熒光顯微鏡下觀察。
（2）免疫金銀染色技術(shù)：利用膠體金標(biāo)記T淋巴細(xì)胞分化抗原對應(yīng)的特異性抗體，通過免疫反應(yīng)使膠體金顆粒沉積在抗原位置，加入銀顯影液，用對苯二酚將銀離子還原成銀原子，被還原的銀原子沉積在膠體金顆粒周圍形成“銀殼”，最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質(zhì)。易于辨別陽性物質(zhì)，而且能檢測微量的抗原。
2.流式細(xì)胞術(shù)
利用熒光素標(biāo)記的T淋巴細(xì)胞分化抗原對應(yīng)的單克隆抗體做分子探針，在流式細(xì)胞儀上檢測T淋巴細(xì)胞分化抗原的表達(dá)，計(jì)數(shù)T淋巴細(xì)胞分化抗原陽性細(xì)胞的百分率。
臨床意義
1.CD1
在所有胸腺皮質(zhì)中的胸腺細(xì)胞都可以檢測到CD1分子的表達(dá)，在激活的單核細(xì)胞和朗格漢斯細(xì)胞中也表達(dá)CD1。
2.CD2
在T細(xì)胞發(fā)育的早期階段表達(dá)，由于抗CD2單克隆抗體可以激活早期T淋巴細(xì)胞祖細(xì)胞，因此CD2抗原可能出現(xiàn)在功能性T細(xì)胞受體表達(dá)之前，是胸腺細(xì)胞激活中可以利用的一種受體。
3.CD3
在早期胸腺細(xì)胞和成熟T細(xì)胞中表達(dá)，與T淋巴細(xì)胞密切聯(lián)系，這種抗原經(jīng)常在急性T淋巴細(xì)胞白血病中表達(dá), CD3陽性細(xì)胞降低見于如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病。
4.CD5
在所有的T細(xì)胞上都可以發(fā)現(xiàn)CD5抗原，它出現(xiàn)在T淋巴細(xì)胞個體發(fā)育的早期階段，在外周血和臍帶血中B細(xì)胞的一些細(xì)胞亞群上也可以檢測到CD5的存在。
5.CD7
在T細(xì)胞個體發(fā)育的非常早期就會有所表達(dá)，但在T細(xì)胞成熟的最后階段這一抗原會丟失，CD7的功能還不清楚，單核細(xì)胞和NK細(xì)胞也表達(dá)這種CD7抗原。
6.CD4和CD8
在抗原激活T細(xì)胞時，CD4和CD8作為一種共同的受體，CD4也是人類免疫缺陷病毒的受體。CD4陽性細(xì)胞數(shù)／CD8陽性細(xì)胞數(shù)比值降低見于艾滋病、惡性腫瘤等；CD4陽性細(xì)胞數(shù)／CD8陽性細(xì)胞數(shù)比值增高見于自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、器官移植排斥反應(yīng)等。
7.CD25
這種抗原表達(dá)在激活的T、B淋巴細(xì)胞上。
8.CD28
表達(dá)在靜止的T細(xì)胞上，CD28是環(huán)孢菌素抵抗的T細(xì)胞表面受體，與信號傳導(dǎo)途徑有關(guān)。
9.CD45
在所有的造血細(xì)胞中都有CD45的表達(dá)，缺乏CD45表達(dá)的T細(xì)胞對各種刺激都不會產(chǎn)生反應(yīng)。
