過(guò)氧化氫酶km值測(cè)定實(shí)驗(yàn)誤差原因
因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的錐形瓶有殘留水分,稀釋了溶液。
Km呈負(fù)值(即整條直線都向下移動(dòng)),亦即所有測(cè)定的v值都偏大。由v= ,故推斷最有可能的原因是v2整體測(cè)量值偏小,v2偏小的可能原因是H2O2本身的分解;此外,滴定時(shí)讀數(shù)不準(zhǔn)確也會(huì)對(duì)本實(shí)驗(yàn)造成較大影響。
前者通過(guò)測(cè)定PHD催化
H2O2反應(yīng)后剩余的H2O2與碘化物作用生成碘量的變化計(jì)算PHD活性。該法設(shè)備簡(jiǎn)易,但操作復(fù)雜,誤差較大。后者的原理是H2O2為有電活性物質(zhì),但經(jīng)PHD催化后其產(chǎn)物為無(wú)電活性物質(zhì),用鉑電極來(lái)測(cè)量PHD催化前后電流變化引起電壓的變化,測(cè)出PHD活性大小。還可應(yīng)用分光光度法、瓦氏呼吸儀檢壓法、硫酸高鈰法等。
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