什么是sgRNA
shRNA是short hairpin RNA 的縮寫。翻譯為“短發(fā)夾RNA”。shRNA包括兩個短反向重復(fù)序列，中間由一莖環(huán)（loop）序列分隔的，組成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，幾個基因有一段核苷酸序列重疊在一起。
重疊基因中不僅有編碼序列也有調(diào)控序列，大基因內(nèi)包含小基因。重疊基因有多種重疊方式，更重要的可能是參與對基因的調(diào)控如。
向?qū)NA 可以與非編輯的mRNA序列互補，并加入尿嘧啶U，產(chǎn)生編輯的mRNA。所以說向?qū)NA是作用于pre-mRNA 也就是mRNA的前體，同樣是DNA轉(zhuǎn)錄的直接產(chǎn)物。
基因，dna或rna分子上含特定遺傳信息的一段核苷酸序列，是遺傳物質(zhì)的最小功能單位。基因在染色 體上星線性排列，每個基因都有一定的位置，即座位。在同源染色體。
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一種來自細. 通過基因工程手段對crRNA和tracrRNA進行改造，將其連接在一起得到sgRNA(single。
有兩種方法：1，體外轉(zhuǎn)錄sgRNA+ tracrRNA，然后跟cas9蛋白同轉(zhuǎn)化細菌；2，是構(gòu)建適合你得菌的敲除質(zhì)粒，主要是啟動子這塊需要考慮，但是質(zhì)粒進去了你得考慮到質(zhì)。
如果是要體外合成grna 一般都是找外包做吧 如果已有寡核苷酸 那就直接放入cas表達載體即可，可用Thermo公司的。
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