免疫學實驗--轉(zhuǎn)B淋巴細胞表面標志介紹
B淋巴細胞表面標志介紹:
體液免疫功能檢測是實驗室估評個體體液免疫功能的一類檢驗。體液免疫功能檢測根據(jù)體液免疫的基本過程,包括B淋巴細胞檢測、Ig檢測以及抗體產(chǎn)生功能的檢測等。
B淋巴細胞表面標志正常值:
IgM均值11.2±6.0%;IgG均值7.5±3.3%。
B淋巴細胞表面標志臨床意義:
B細胞數(shù)量的降低與體液免疫缺陷有關(guān),B細胞數(shù)升高則與B細胞惡性增生等有關(guān)。
B淋巴細胞表面標志注意事項:
(1)熒光抗體試劑中存在凝聚IgG的影響,凝聚IgG可以和B細胞表面Fc受體結(jié)合出現(xiàn)假陽性,因此,為避免出現(xiàn)凝聚IgG須注意:
?、俨荒苁褂肍/P克分子比值過高的熒光抗體,一般以1-3為宜。
②含低濃度蛋白的熒光抗體低溫保存不穩(wěn)定,一般不應(yīng)低于2mg/ml。
?、鄣蜏乇4娴臒晒饪贵w不可反復(fù)凍融,使用前150000r/min離心30min,除去凝聚物。
(2)活的淋巴細胞作免疫熒光染色時,在全部試劑中(標記抗體、Hank液等)均需加NaN3,以限制細胞膜的流動性。否則會出現(xiàn)帽狀熒光和吞噬現(xiàn)象,熒光細胞實際數(shù)下降。
(3)用抗IgG熒光抗體染色時,可由于標本中含有抗原一抗體(IgG型)免疫復(fù)合物與B細胞表面Fc受體結(jié)合,表現(xiàn)為熒光陽性。為此,有人建議用熒光標記抗F(ab)2抗體染色,以排除Fc受體被著染。
(4)如果當天不能觀察標本,則將細胞懸于熒光抗體保存液中,4℃存放,次日計數(shù)。
近年來由于抗B細胞表面特異分子(CD19、CD20等)單克隆抗體的問世,因而人們開始傾向于應(yīng)用熒光素標記的抗CD19或CD20的單克隆抗體直接與外周血淋巴細胞反應(yīng);或用抗CD19和CD20的單克隆抗體(第一抗體)先與淋巴細胞反應(yīng),再與熒光素標記的兔或羊抗鼠IgG(第二抗體)結(jié)合,熒光顯微鏡下計數(shù)或流式細胞術(shù)來計數(shù)外周血B淋巴細胞。
B淋巴細胞表面標志檢查過程:
暫無相關(guān)信息
相關(guān)疾病
聯(lián)合免疫缺陷病,Kaposis肉瘤
相關(guān)癥狀
暫無相關(guān)信息