分析測試百科網(wǎng) > 行業(yè)資訊 > 企業(yè)風(fēng)采

專訪AOAC委員，探究食品微生物檢測新方法

2018.8.29

——專訪布魯克?道爾頓微生物全球發(fā)展經(jīng)理Daniele Sohier博士

　　分析測試百科網(wǎng)訊 2018年，我國食品、藥品、化妝品等工業(yè)領(lǐng)域的國家監(jiān)管體系發(fā)生重大調(diào)整，工業(yè)微生物安全監(jiān)控模式與技術(shù)體系創(chuàng)新計日可待。據(jù)統(tǒng)計，微生物污染連續(xù)多年是影響全球食品安全、藥品安全的首要因素。為把握工業(yè)微生物安全控制領(lǐng)域法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)動向，探討新形勢下國內(nèi)外微生物檢測、鑒定、分型、溯源、評價前沿技術(shù)與應(yīng)用，助力工業(yè)企業(yè)應(yīng)對微生物安全共性挑戰(zhàn)，中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心組織舉辦第七屆“工業(yè)企業(yè)微生物安全控制技術(shù)與實踐研討會”。在此次研討會召開前夕，分析測試百科網(wǎng)有幸采訪到布魯克全球發(fā)展經(jīng)理Daniele Sohier博士，邀請Sohier博士以自身的經(jīng)歷，暢談布魯克在食品微生物檢測中發(fā)揮的作用。

從左至右：布魯克?道爾頓微生物與診斷部門亞太區(qū)總監(jiān)石工一博士，工業(yè)微生物全球發(fā)展經(jīng)理Daniele Sohier博士，應(yīng)用工程師祝坤

長期為國際食品和微生物標(biāo)準(zhǔn)化和認(rèn)證組織工作

　　在2016年加入布魯克之前，Daniele Sohier博士一直在第三方實驗室從事食品和工業(yè)微生物檢測方面的工作。作為ISO和AOAC專業(yè)組委會的召集人，Sohier博士長期從事標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證、制定和比對工作。她還參加歐洲MicroVal認(rèn)證組織，以技術(shù)專家委員會的身份進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)方法的建立和比對工作。作為明年IAFP歐洲輪值主席，Sohier博士正在負(fù)責(zé)即將于2018年11月在上海舉辦的亞洲年會的組織工作。

　　Sohier博士也向我們普及了幾大組織的特點。AOAC和ISO專業(yè)組是全球最重要的標(biāo)準(zhǔn)委員會，主要工作是組織行業(yè)專家為相應(yīng)的行業(yè)、協(xié)會制訂分析檢測標(biāo)準(zhǔn)，并為新技術(shù)（如MALDI Biotyper）的準(zhǔn)入提供參比準(zhǔn)則。另外他們也組織或策劃新技術(shù)和新方法的認(rèn)證工作。ISO和AOAC同為制定標(biāo)準(zhǔn)，只不過ISO認(rèn)證的工作由其它機構(gòu)如MicroVal或AFNOR等完成，而AOAC則是通過下屬AOAC研究中心（AOAC Research Institute）來完成。IAFP是一個關(guān)注食品安全的國際性組織，注重組織和籌劃專業(yè)性會議，進(jìn)行相關(guān)學(xué)術(shù)和法規(guī)方面的交流。今年七月在美國鹽湖城舉辦的IFAP年會，參會人數(shù)高達(dá)3,600多人。IFAP在迪拜和拉丁美洲也舉辦了相應(yīng)的區(qū)域會議，2018年11月在上海的IAFP亞太區(qū)會議正在積極籌辦中。

　　相關(guān)名詞

　　ISO：International Organization for Standardization 國際標(biāo)準(zhǔn)化組織

　　AOAC：Association of Official Analytical Chemists 美國分析化學(xué)家協(xié)會

　　MicroVal：國際認(rèn)證機構(gòu), 用于驗證和批準(zhǔn)食品及飲料微生物分析的替代方法。MicroVal 為 ISO 16140-2:2016，ISO/DIS 16140-6:2017和其他驗證標(biāo)準(zhǔn)提供驗證和認(rèn)證。MicroVal證書表明，專有方法同樣等價于《國際標(biāo)準(zhǔn)化》參考方法。

　　IFAP：International Association for Food Protection國際食品保護(hù)協(xié)會，由4,000多名食品安全專業(yè)人士組成的協(xié)會, 致力于食品安全全球化推進(jìn), 向全世界的食品安全專業(yè)人員提供論壇, 交流有關(guān)保護(hù)食品供應(yīng)的信息。

　　AFNOR：法國標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會

用標(biāo)準(zhǔn)化推動MALDI Biotyper的應(yīng)用

布魯克 MALDI Biotyper

　　 “自2016年加入布魯克以來，我的工作重點是食品和工業(yè)微生物應(yīng)用，而重中之重是確保Bruker在食品和工業(yè)微生物的分析檢測技術(shù)能夠符合AOAC和ISO的標(biāo)準(zhǔn)?！?Sohier博士談到了MALDI Biotyper通過標(biāo)準(zhǔn)和認(rèn)證工作的意義：首先，如何證明新技術(shù)是與現(xiàn)有技術(shù)相似甚至更好，我們需要提供更多的信息。其次，雖然AOAC和ISO所制定的標(biāo)準(zhǔn)具有相似性，但不同國家對AOAC和ISO的標(biāo)準(zhǔn)選擇也有不同偏好。

　　AOAC：收錄兩項方法，獲評年度最佳方法

　　“我們的工作進(jìn)展非常迅速。我們從2017年5月開始進(jìn)行AOAC認(rèn)證，2017年9月至10月進(jìn)行了不同實驗室間的檢測結(jié)果比對；2017年12月這兩種方法最終被收錄為OMA (Official Methods of Analysis) 方法。我們認(rèn)證的微生物范圍之廣，內(nèi)容之多，在AOAC的認(rèn)證歷史中尚屬首次。首先，這種方法不僅能夠準(zhǔn)確鑒定幾種常見控制菌，如沙門氏菌、克羅諾桿菌、李斯特菌；同時通過Bruker龐大的數(shù)據(jù)庫也可以實現(xiàn)其他革蘭氏陰性及革蘭氏陽性細(xì)菌的鑒定?！盨ohier博士說到。

　　今年布魯克MALDI Biotyper兩項檢測方法獲得AOAC國際組織授予的2018年“AOAC年度最佳方法”。

　　通過ISO 16140-Part 6 標(biāo)準(zhǔn)

　　布魯克也聯(lián)合MicroVal進(jìn)行基于ISO 16140-Part.6方面的標(biāo)準(zhǔn)方法認(rèn)證。雖然還沒完全定稿，但布魯克已完成相應(yīng)的方法比對和認(rèn)證等工作。

　　ISO 16140-Part 6是近年來新建立的微生物檢測標(biāo)準(zhǔn)，“在這個條款正式發(fā)布前，沒有其它檢測標(biāo)準(zhǔn)條款與其類似，目前選擇ISO方案作為檢測標(biāo)準(zhǔn)的國家非常期待這個方法正式發(fā)布”，Sohier博士表示。此前，布魯克與MicroVal進(jìn)行合作，通過與不同國家的食品監(jiān)管機構(gòu)、廠商、第三方實驗室以及相關(guān)使用者共同建立符合ISO 16140-Part 6的MALDI Biotyper的菌種確認(rèn)方法。Bruker是第一家通過ISO 16140-Part 6的MALDI檢測方法的儀器生產(chǎn)商。“我們已得知另一個廠家也開始聯(lián)系MicaoVal做認(rèn)證，因此布魯克在此方面算得上是開了先河?！盨ohier博士說。

　　MALDI Biotyper檢測方法通過ISO 16140-Part 6認(rèn)證后，布魯克的合作伙伴可以使用這項便捷的檢測方法進(jìn)行菌種確認(rèn)。同時，Sohier博士也表示，布魯克非常自豪地以先驅(qū)者的身份開拓了一條快速檢測菌種的方法，希望未來布魯克能夠開發(fā)出更多的快速檢測金標(biāo)準(zhǔn)。

　　OMA認(rèn)證的挑戰(zhàn)

　　回顧方法認(rèn)證過程中的挑戰(zhàn)，Sohier博士談到兩點，“第一點是李斯特菌的鑒定方法，第二點是組織大規(guī)模不同實驗室進(jìn)行比對的工作”。面對第一點挑戰(zhàn)，目前世界上普遍方法采用蛋白質(zhì)提取法進(jìn)行此類菌種鑒定，蛋白提取法工作量大，花費時間長。布魯克采用全新的subtyping（分型）技術(shù)，無需提取蛋白質(zhì)，直接用涂抹法即可快速鑒定李斯特菌。面對第二點挑戰(zhàn)，布魯克共組織了四項比對試驗，兩項在歐洲做，兩項在美國做；每項對比試驗邀請14家實驗室參與?！叭绱舜蟮墓ぷ髁课覀兪孪纫矝]有太多的思想準(zhǔn)備，但最后我們發(fā)現(xiàn)，比對中錯誤的結(jié)果全部來源于傳統(tǒng)方法，而用MALDI Biotyper技術(shù)的結(jié)果都是正確的，這個結(jié)果讓我們倍受鼓舞。”Sohier博士興奮地說。

　　PTM與OMA的區(qū)別

　　Sohier博士表示，PTM（Performance Tested Method）雖然也屬于AOAC認(rèn)證，但其分析方法的提供者是儀器廠家本身，而且PTM不需要進(jìn)行室間評估，只需要單一實驗室提供比對結(jié)果即可。PTM主要的實驗室數(shù)據(jù)可以由廠家提供，極少部分實驗數(shù)據(jù)由專家實驗室驗證。而OMA認(rèn)證由兩部分組成，實驗室間預(yù)比對和比對實驗，其中比對實驗必須在第三方實驗室完成，并且儀器生產(chǎn)商不允許直接參與比對實驗，因此OMA認(rèn)證難度和權(quán)威性遠(yuǎn)高于PTM認(rèn)證。

　　為何能夠獲得AOAC年度大獎

　　 “第一點是技術(shù)本身的先進(jìn)性，第二點是實驗流程設(shè)計、數(shù)據(jù)量和數(shù)據(jù)質(zhì)量均得到大幅提升?！?Sohier博士說。此前，食品微生物的檢測技術(shù)上有很多新方發(fā)出現(xiàn)，但鑒定和確認(rèn)技術(shù)卻停滯不前，用戶需要花很長時間才能得到結(jié)果。而現(xiàn)在用戶可以用MALDI Biotyper做鑒定和確認(rèn)，大幅縮短了分析時間。時間上的比對有兩大提升，一是整個檢測流程的時間，另一個是實驗操作時間。傳統(tǒng)方法的實驗操作時間，不同的細(xì)菌，需時3-30分鐘不等；對于95%以上的微生物采用MALDI Biotyper檢測，每個樣本的檢測時間僅需20秒。傳統(tǒng)方法從實驗開始，第二天或第三天才能獲得結(jié)果；而MALDI Biotyper法，依據(jù)檢測樣本的數(shù)量（1-95個），獲得結(jié)果的時間是15-60分鐘。

未來食品微生物檢測面臨的機遇、挑戰(zhàn)及發(fā)展

　　食品中的微生物有其多樣性和復(fù)雜性，其中某些細(xì)菌因為非常相似，因此很難進(jìn)行明確的區(qū)分。但因為這些微生物有的對食品無害，有的具有腐敗作用，有的卻是致病菌，因此如何準(zhǔn)確的區(qū)分這些細(xì)菌對微生物學(xué)家和儀器廠商來說是機遇與挑戰(zhàn)并存。

　　MALDI檢測法3大優(yōu)點使其成為金標(biāo)準(zhǔn)

　　MALDI檢測方法近年來逐漸成為食品微生物檢測首選，有如下三大技術(shù)優(yōu)勢：

　　1.檢測速度快。MALDI檢測方法速度最快，只需20秒，超過目前所有微生物分析方法；即使核酸法也需要十幾分鐘到幾個小時。

　　2.MALDI不需要特殊的使用環(huán)境，無需建立高標(biāo)準(zhǔn)要求的實驗室，而核酸技術(shù)對實驗環(huán)境要求較苛刻。

　　3.檢測人員無需高深的專業(yè)背景即可完成檢測。分子生物學(xué)方法需要比較專業(yè)的人士。根據(jù)布魯克所提供的培訓(xùn)方案，檢測人員只需一天的培訓(xùn)即可達(dá)到相應(yīng)檢測能力要求，完成微生物檢測。

　　標(biāo)準(zhǔn)化的檢測機構(gòu)對于MALDI檢測方法非常青睞，它符合標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)，并可適用于不同的實驗室的環(huán)境和條件。例如ISO兩個標(biāo)準(zhǔn)化的方法用作Campylobacter（彎曲桿菌）和Vibrio（弧菌）的鑒定。自從MALDI Biotyper成為OMA方法以來，用MALDI Biotyper鑒定這兩種細(xì)菌的方法不再是替代法，而成為金標(biāo)準(zhǔn)。

　　應(yīng)對微生物檢測的挑戰(zhàn)

　　精準(zhǔn)地區(qū)分近緣細(xì)菌是微生物檢測一直以來面對的挑戰(zhàn)。布魯克致力于提高鑒別的分辨率，一方面通過開發(fā)新的軟件和新的算法提高分辨能力；另外一方面研發(fā)全新的技術(shù)，除了MALDI Biotyper技術(shù)以外，布魯克正在致力于開發(fā)基于傅里葉紅外光譜技術(shù)的IR Biotyper方法進(jìn)行菌株分型。

　　食品微生物檢測的發(fā)展趨勢

　　“簡單、簡單、再簡單”，Sohier博士毫不猶豫地回答：“操作簡單，數(shù)據(jù)分析后獲得簡單明了的結(jié)果。”布魯克的技術(shù)無論是質(zhì)譜法還是紅外法，同全基因組分析技術(shù)都是互補的，布魯克的技術(shù)操作簡單、結(jié)果準(zhǔn)確清晰、檢測成本經(jīng)濟；而全基因組分析不僅需要很強的核酸技術(shù)背景，也需要很強大的數(shù)據(jù)分析能力。而在食品工業(yè)里，時間非常重要，因為有些食品容易腐敗，即使對保質(zhì)期較長的食品，存儲也會增加成本。有些食品保質(zhì)期很短，有些是發(fā)酵食品，時間一長性質(zhì)就會變化。所以快速、簡便的方法非常符合市場需求。“我們開發(fā)產(chǎn)品的思路是給基層的操作人員使用，為決策層提供準(zhǔn)確、實時的數(shù)據(jù)。在食品工業(yè)中能夠準(zhǔn)確快速的判斷對于經(jīng)濟上的影響也非常大，可以大幅提升決策者的風(fēng)險控制能力。我們提供精準(zhǔn)、復(fù)雜的技術(shù)，而目的卻是簡便的操作，提供準(zhǔn)確、實時的數(shù)據(jù)。”Sohier博士說。

　　CICC在標(biāo)準(zhǔn)化方面發(fā)揮的作用

　　“我非常榮幸以演講嘉賓身份收到CICC（China Centre of Industrial Culture Collection中國工業(yè)菌種保藏中心）主辦方的邀請，并且我一到中國就像公主一樣受到熱情接待”，Sohier博士說到。Sohier博士表示，這次CICC在中國舉辦的學(xué)術(shù)會議與歐美無異，學(xué)術(shù)氛圍非常好，同時針對不同研究方向也有非常好的準(zhǔn)備。此次CICC在中國舉辦的會議為學(xué)術(shù)界提供了一個絕佳的實踐和教學(xué)的機會，為推動工業(yè)和食品微生物檢測在中國的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。

　　在此次會議期間，布魯克與CICC也達(dá)成共識，雙方一致認(rèn)為法規(guī)的一致性對于廠商和實驗室非常重要，無論在食品、工業(yè)品還是藥品檢測，檢測標(biāo)準(zhǔn)是保證出廠產(chǎn)品質(zhì)量的最后一道防線。由于中國處于全球一體化進(jìn)程當(dāng)中，交易、貿(mào)易和法規(guī)的一致性是保證交易機制、質(zhì)量控制、風(fēng)險評估的重要手段，“無論是在檢測標(biāo)準(zhǔn)方面，還是在貿(mào)易往來方面，標(biāo)準(zhǔn)化是保證秩序的重要手段，因此我希望CICC在標(biāo)準(zhǔn)化方面能夠發(fā)揮更大的作用?！盨ohier博士說到。

　　Daniele Sohier博士現(xiàn)擔(dān)任布魯克微生物與診斷部門工業(yè)微生物全球業(yè)務(wù)發(fā)展經(jīng)理，主要負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)溝通產(chǎn)品研發(fā)與市場需求，推動布魯克與各國際組織之間的密切合作，促進(jìn)布魯克微生物產(chǎn)品的認(rèn)證和推廣，使得布魯克擁有的新技術(shù)能夠在工業(yè)微生物領(lǐng)域更符合規(guī)范的同時獲得更多的認(rèn)知和發(fā)展。

　　Daniele Sohier博士簡介：

　　ISO/CEN國際標(biāo)準(zhǔn)化組織工作組召集人/委員，法國標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會 (AFNOR)認(rèn)證委員會委員，歐盟認(rèn)證機構(gòu)MicroVal技術(shù)委員會委員，國際分析家協(xié)會AOAC委員，歐洲國際食品保護(hù)聯(lián)合會(IAFP)主席。在ISO、AOAC等國際標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證、微生物學(xué)國際標(biāo)準(zhǔn)方法驗證以及分子生物學(xué)技術(shù)在食品安全質(zhì)量中的研究應(yīng)用等方面有著豐富的經(jīng)驗。1999年至今歷任法國農(nóng)業(yè)研究院助理教授，法國ADRIA食品技術(shù)研究院食品安全質(zhì)量專家及實驗室方法驗證專家，現(xiàn)擔(dān)任布魯克微生物與診斷部門工業(yè)微生物全球業(yè)務(wù)發(fā)展經(jīng)理。

maldi 布魯克食品微生物 biotyper daniele

分析測試百科網(wǎng)

喜歡作者我要約稿

本文相關(guān)廠商